Является правопреемником литературного музея Воронежского края, открытого в 1924 году в доме, где жил и умер поэт И.С. Никитин. В музейных фондах (около 26 000 единиц хранения) находятся разнообразные творческие и биографические материалы (рукописи, письма, дневники, документы, фотографии и прочие экспонаты), редкие издания книг, произведения изобразительного искусства, мемориальные предметы писательского быта, имеется специальная библиотека.

С 1975 года в течение нескольких лет при Литературном областном музее имени И.С. Никитина функционировал Клуб литературных встреч под руководством Г.В. Антюхина. Постоянно действуют экспозиции, посвященные А.В. Кольцову (1984), И.А. Бунину (1995), A.П. Платонову (1999); они размещаются в здании, являющемся памятником истории и архитектуры федерального значения (улица Плехановская,3).

Современное наименование музей получил в 1994 году.

Литературный областной музей имени И.С. Никитина имеет филиалы: мемориальный дом И.С. Никитина, музей-квартиру М.Н. Мордасовой, музей-усадьбу Д.В. Веневитинова.

Сотрудники Литературного областного музея имени И.С. Никитина публикуют на страницах журнала «Подъем» и других изданиях различные тексты из собрания музея, организуют юбилейные выставки, встречи с писателями.

Ежегодно в Литературном областном музее имени И.С. Никитина бывает более 40 000 посетителей.